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本页供产品选型与实验规划参考,完整操作及限制请参阅 PRC004 系列产品说明书。
本试剂盒用于从培养细胞中生产并纯化迁移体。流程不使用密度梯度,而是在差速离心粗提后通过精提试剂与免疫磁珠阴选减少内膜来源污染。
适用于可迁移的贴壁细胞系或原代细胞。细胞迁移能力、铺种密度、细胞外基质及消化条件均需按细胞体系优化。
组分及保存条件
| 组分名称 | 数量 | 保存条件 |
|---|---|---|
| 基质液 A | PRC004:1.5 mLPRC004S:300 μL | -20℃保存。 |
| 缓冲液 B | PRC004:50 mLPRC004S:10 mL | 4℃保存;精提液 C 可在-20℃延长保存但须避免反复冻融;磁珠液 D 切勿冷冻或结冰。 |
| 精提液 C | PRC004:200 μLPRC004S:40 μL | 4℃保存;精提液 C 可在-20℃延长保存但须避免反复冻融;磁珠液 D 切勿冷冻或结冰。 |
| 磁珠液 D | PRC004:400 μLPRC004S:80 μL | 4℃保存;精提液 C 可在-20℃延长保存但须避免反复冻融;磁珠液 D 切勿冷冻或结冰。 |
PRODUCT FEATURES
产品优势
生产纯化一体化
覆盖细胞铺种、迁移体生产、粗提和磁珠精提,满足培养细胞迁移体的一站式制备需求。
免密度梯度纯化
采用精提液与磁珠阴选系统进行纯化,无需配制密度梯度或使用超速离心机。
快速易操作
简化传统密度梯度纯化流程,使用最高18,000×g离心机和磁力架即可完成操作。
下游应用广泛
精提样品可用于迁移体计数、蛋白质与RNA分析及细胞功能测试等实验。
EXPERIMENTAL WORKFLOW
实验流程
EXAMPLE RESULTS
结果示例
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L929-Tspan4-GFP 迁移体粗提与阴选后原位共聚焦对比
L929-Tspan4-GFP;粗提与阴选后对比;Tspan4-GFP、Calnexin 和内膜通道。
FAQ
常见问题
是否需要超速离心或密度梯度?
本流程采用18,000×g粗提与免疫磁珠阴选,不使用密度梯度纯化。
哪些细胞适用?
推荐可迁移的贴壁细胞系或原代细胞。不同细胞的迁移能力、培养密度、基质和消化条件需自行优化。
粗提上样量如何确定?
说明书通常推荐约50 μg粗提迁移体上样;L929细胞精提得率约50%,不同细胞可能有较大差异,应根据实际样品优化。
磁珠液如何保存?
磁珠液 D 于4℃保存并严格避免冷冻或结冰,使用前需充分混匀。
纯化后迁移体如何保存?
核酸或蛋白研究可将去上清后的沉淀置于-80℃;形态、数量、表面性质或活性研究更适合4℃短期保存。冻存可能引起聚团或破裂。




