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产品说明书本产品用于从培养细胞中粗提迁移体。完整操作条件和限制请参阅说明书。
粗提所得迁移体可用于后续经典密度梯度精提取（PRC003/PRC003S）或阴选法精提取（PRC005/PRC005S）。
推荐具有迁移能力的贴壁细胞系或原代细胞；不同细胞的迁移体产生能力需自行测试。正式生产前，建议用 WGA 原位染色并通过显微镜观察迁移体产生情况。
组分及保存条件
| 组分名称 | 数量 | 保存条件 |
|---|---|---|
| 基质液 J | PRC002：1.5 mL；PRC002S：300 μL | 4℃运输，收到后于-20℃保存。 |
| 稀释液 K | PRC002：50 mL；PRC002S：10 mL | 4℃运输，收到后于4℃保存。 |
| 说明书 | PRC002：1份；PRC002S：1份 | 不适用。 |
PRODUCT FEATURES
产品优势
培养细胞迁移体粗提
提供从细胞铺种、迁移体生产到差速离心粗提的标准化制备流程。
操作流程简洁
仅需常规细胞培养及最高18,000× g离心条件，无需进行超速离心或磁珠纯化。
适配多类培养细胞
适用于具有迁移能力的贴壁细胞系和原代细胞，可根据细胞特性优化生产条件。
兼容多种纯化路线
所得粗提迁移体可进一步用于经典密度梯度纯化或免疫磁珠阴选纯化。
EXPERIMENTAL WORKFLOW
实验流程
FAQ
常见问题
PRC002 是否包含后续精提？
本试剂盒的得物为粗提迁移体沉淀。后续经典密度梯度精提适配 PRC003/PRC003S，阴选法精提适配 PRC005/PRC005S。
组分中的稀释液 K 是否可直接用于1:300配制？
请先按 PBS:试剂 K＝9:1 配制 K 稀释液，再按基质液 J:K 稀释液＝1:300 配制预处理液。
收集前的细胞密度与培养时间如何选择？
需按细胞来源优化。建议收集时汇聚度20%–40%，迁移较快者适当更低；生产时间一般建议12–16小时。
哪些离心步骤保留上清，哪些保留沉淀？
300×g、5分钟及2,500×g、10分钟后均保留上清；18,000×g、60分钟后弃去上清，保留粗提迁移体沉淀。三次离心均在4℃进行。
应使用什么离心转子？
低速离心建议使用水平转子；高速离心建议使用倾斜角度大于45°的角转子。
粗提迁移体如何保存？
按下游用途选择。用于核酸提取、WB、质谱等内容物分析时，可高速离心去上清后将沉淀于-80℃保存；关注形态、数量、表面性质或活性的实验推荐4℃保存。一周内4℃保存对形态和数量影响较小；-20℃或-80℃冻存会引起聚团和一定破裂，必须冻存时建议先做预实验。
需要自备哪些试剂及设备？
细胞培养试剂和耗材（如胰酶、培养皿）、无菌1×PBS、低吸附1.5 mL EP管、15 mL及50 mL离心管、低吸附枪头，以及低速平转子离心机和高速斜转子离心机。
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