产品简介：

本产品通过特定磁珠去除血小板、T/B/NK等免疫细胞来源迁移体等，可从人全血样品提取中性粒细胞来源迁移体。

本产品仅共科研使用，不得用于任何临床诊断、治疗或其他医疗用途。

产品应用：

提取后的迁移体可用于荧光染色成像分析、流式分析、核酸提取、蛋白提取及生化分析、质谱分析、细胞功能实验等

适配样品：

首选样品为新鲜采集的全血，抗凝方法首选枸橼酸钠，也可处理EDTA抗凝样品，但血小板碎片污染会有所提升。

可用于处理新鲜或存放在-80℃的冻存血浆样本（由于不同离心转速收集血浆造成的迁移体损失程度的不同及冻融导致的血小板碎片增加等因素，可能会影响本试剂盒的产率和得率）。

本试剂盒不适用于血清样品及通过滤血膜处理得到的血浆样本。

产品优势

快速、高效：仅需约40分钟手动操作

产物质量可靠：血小板、红细胞及胞体蛋白污染较少

可用于后续多种实验：兼容成像类、生化类、质谱类、功能类等实

实验设备要求低：仅需台面低温高速离心机，无需超速离心机

实验流程：

组分及保存条件：

提取效果展示：

样品提取前（左）及提取后（右）样品荧光共聚焦显微镜成像对比：可见血小板杂质被较好去除，且中性粒细胞迁移体被保留和富集。CD66B及CD16：中性粒细胞标记；CD41：血小板碎片标记。

试剂盒提取后获得迁移体的染色。CD235a：血红细胞；CD66B：中性粒细胞；CD41：血小板碎片

WB检测结果及扫描电镜结果

负染透射电镜结果（左）及扫描电镜结果（右）；扫描电镜图中的小颗粒为CD66B磁珠

1. 样品选择：全血vs血清vs血浆？

本方法首选新鲜的全血样品，产物纯度的得率均会提升；由于迁移体会在凝血过程中沉降，血清样品无法用于迁移体提取；滤膜法获得的血浆样品由于滤膜尺寸与迁移体大小不符，也无法用于迁移体提取。

2. 血液采集方法？

建议枸橼酸钠抗凝采集；EDTA采集法会使血小板碎片污染增加；本试剂盒尚未对使用其他类型抗凝剂的血液样本进行测试。用户如需使用其他抗凝剂类型采集的血液样品或其他样品来源，建议自行评估其适用性。

3. 样本保存方法？

全血样本在进行迁移体提取前的存放时间不应超过4小时，否则溶血现象可能严重影响迁移体的分离效果。

4. 血小板碎片污染严重？

可尝试更新鲜的血样，或尝试枸橼酸钠抗凝，以及降低吹打力度。

5. 产物得率较低？

20,000xg高速粗提全血迁移体时，推荐尽可能使用45° （或更大）倾角的定角转子；使用低蛋白吸附的移液枪头及EP管；使用新鲜血样；增加起始血液量

6. 如何对产品进行鉴定确认其为迁移体？

确信度最高的鉴定方法为形态学鉴定，即在电镜中可观测到包含部分收缩丝的0.5μm-2μm囊泡；除此之外，可以通过标记物组合去判断迁移体富集程度，例如应该上调迁移体标记物（如ITGA5, ITGA4等），下调细胞标记物（Histone H3，Calnexin等），下调其他囊泡标记物（如Tsg101、Alix、Arf6等），包含迁移体来源细胞表面标记物（例如中性粒细胞 CD66B、CD16等）。

需要注意的是，本试剂盒在富集迁移体的同时仍会收集部分微囊泡（MV），如有对比需求，建议添加一组使用标准方法提取的微囊泡作为参照。